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1、使用SYBR®GreenⅠ做熒光標記方法,如何設定淬滅基團?在ABI7500定量PCR儀操作軟件上,SYBR®GreenI做報告基團,淬滅基團選擇“None”。2、ABI7500定量PCR儀樣品的升降溫速率是多少?標準模...
熒光定量PCR儀的PCR技術擴增時引物與己提供DNA雙鏈有何關系?單鏈DNA在互補寡聚核苷酸片段的引導下,可以利用DNA聚合酶按5’→3’方向復制出互補DNA。這時單鏈DNA稱為模板DNA,寡聚核苷酸片段稱為引物,合成的互補DNA稱為產物D...
熒光定量PCR儀引物設計的目的是為了找到一對合適的核苷酸片段,使其能有效地擴增模板DNA序列。因此,引物的優劣直接關系到PCR的特異性與成功與否。要設計引物首先要找到DNA序列的保守區。同時應預測將要擴增的片段單鏈是否形成二級結構。如這個區...
熒光定量PCR技術已成為臨床分子檢測的重要手段之一,其以敏感性、特異性而被越來越多的科研職員所看好,熒光定量PCR儀的性能與檢測結果的正確性密切相關。下面我們來看看熒光定量PCR儀的操縱程序:1、編輯樣本1)單擊“EditSample”,進...
1.熒光定量PCR儀擴增產物在電泳分析時沒有條帶或條帶很淺·常見的原因在于反應體系是PCR的反應體系而不是RT-PCR的反應體系;·與反應起始時RNA的總量及純度有關;·建議在試驗中加入對照RNA;·*鏈的反應產物在進行PCR擴增時,在總的...
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